Молекулярные маркеры для рака мочевого пузыря

Диагностическое исследование на онкомаркеры является современным методом поиска онкологических заболеваний и позволяет выявить начало роста опухоли.

В успешности антираковой терапии ключевую роль играет ранняя диагностика.

Анализ мочи или крови на онкомаркеры мочевого пузыря и почек позволяет выявить рак мочеполовой системы на первых стадиях, до появления болевых симптомов.

Что такое онкомаркеры

Онкомаркеры – это биологические вещества белкового происхождения, которые обнаруживаются в анализах в случае развития онкологических заболеваний.

Этот метод диагностики позволяет выявить наличие злокачественного новообразования в самом начале его роста, что значительно повышает эффективность последующего лечения.

Результаты анализов на онкомаркеры помогают врачам определять причину плохого самочувствия пациента, но они не являются абсолютно точным показателем наличия злокачественной опухоли.

Новообразования в органах мочевыделительной системы диагностируются только после комплексного обследования: многочисленных лабораторных анализов, биопсии, УЗИ.

Виды онкомаркеров почек и мочевого пузыря

Рак мочевого пузыря в последнее время выявляется все чаще. Из всех случаев онкологических заболеваний данная разновидность диагностируется у 5% пациентов и у каждого 2-го мужчины с никотиновой зависимостью.

Онкомаркеры выявляют с помощью исследования крови или анализа мочи. Превышение нормы содержания онкомаркеров в образцах биоматериала указывает на рост опухоли.

Проходить такое исследование рекомендуется при возникновении любых подозрений на злокачественное новообразование.

Онкомаркеры рака мочевого пузыря:

UBC – на сегодняшний день самый информативный маркер. Единственный перспективный показатель, который всегда выявляет опухоль на самой ранней стадии. По статистике, повышенная концентрация UBC в моче указывает на рак у 70% пациентов.
NMP22 – специфичный белок, выделяемый опухолями. Помогает оценить результативность противоопухолевой терапии.
TPS – онкомаркер, наличие которого помогает выявлять онкологические заболевания не только мочевого пузыря, но и органов ЖКТ и половой системы. Концентрация данного белка в биоматериале резко возрастает при наличии метастазирования. Превышение норм TSP после химиотерапии должно насторожить лечащего врача, так как это свидетельствует о бесполезности пройденного лечения.

При комплексной диагностике онкологических заболеваний мочевого пузыря также смотрят на следующие маркеры: ВТА, фибриноген, протеин ядерного матрикса, продукты цитокератинов.

Наличие этих белков в небольшой концентрации в крови или моче может указывать не только на рак, но и на любой другой патологический процесс.

Данные вещества вырабатываются организмом и в здоровом состоянии, но их синтез активизируется при наличии серьезных патологий, в том числе рака, поэтому высокая концентрация может указывать на появление атипичных клеток в организме.

Онкомаркеры почек для выявления рака:

ХГЧ – гормон, название которого знакомо всем, по нему медики выявляют беременность у женщин. После оплодотворения он начинает активно вырабатываться, блокируя работу репродуктивной системы и тем самым исключая возможность забеременеть повторно. В нормальном состоянии ХГЧ практически не вырабатывается как у женщин, так и у мужчин. Но превышение данного показателя в случае отсутствия беременности может указывать на развитие злокачественной опухоли почек.
TU- M2 – PK(пируваткиназа ) – по концентрации данного вещества врачи делают выводы о степени агрессивности новообразования.
NSE – повышенное содержание этого фермента может указывать на рак почек и легких.

Есть еще один тип маркера рака почки. Он обозначается как HCE. В случае если значения превышены в несколько раз, врач должен назначить дополнительные анализы для выявления раковых клеток.

Онкологи заявляют о том, что на сегодняшний момент не существует специфических маркеров, выявляющих только онкологические заболевания почек.

Все перечисленные показатели могут свидетельствовать о наличии рака, а могут указывать на наличие других патологических состояний.

Поэтому для подтверждения результатов анализов важно проводить комплексное обследование, в том числе биопсию тканей при выявлении опухоли.

Показания для назначения анализов на онкомаркеры

Онкомаркеры на рак почки не сдаются просто так, в рамках профилактических осмотров.

Для назначения таких анализов должны существовать следующие причины:

наличие раковых заболеваний в анамнезе у родных пациента;
проведение химиотерапии при уже выявленной опухоли, анализы берутся после каждого курса;
резкая потеря веса, хроническая усталость;
повышение температуры тела при отсутствии простудной симптоматики;
наличие вредных привычек;
заболевания, которые считаются предраковым состоянием;
работа на вредном производстве;
характерное для онкологических заболеваний увеличение лимфоузлов.

Нельзя поставить точный диагноз только на основании результатов анализов на онкомаркеры. Это можно сделать лишь после ряда сопутствующих исследований.

Противопоказания

Особых противопоказаний для поведения исследования на онкомаркеры нет, можно лишь выделить следующие состояния, при которых необходимо отложить посещение лаборатории:

предшествующие менструации дни (ПМС), поскольку в этот период анализы могут дать ложные результаты из-за изменения гормонального фона;
инфекционные заболевания;
ОРВИ;
наличие патологий в мочеполовой системе.

В каждом конкретном случае решение принимает врач. Существуют такие ситуации, при которых нельзя медлить с обследованием и откладывать анализы на более позднее время.

Подготовка к процедуре

Основные правила подготовки к сдаче биоматериала для обнаружения онкологических маркеров:

за 72 часа до сдачи необходимо исключить употребление алкогольных напитков;
воздерживаться от курения, половой активности и физического труда;
женщинам нельзя сдавать материал на анализ в дни менструации;
исключить из меню копчености и маринады, снизить потребление соли;
прекратить прием антикоагулянтов и других препаратов, в отдельных случаях с разрешения врача можно продолжать пить лекарства перед сдачей крови.

Для достоверности важно проведение лабораторного анализа в день забора крови, но некоторые лаборатории замораживают кровь и исследуют ее позже.

При таком подходе могут появиться ложные результаты, поэтому анализ повторяется несколько раз для подтверждения диагноза.

Онкомаркеры помогают врачу определить направление дальнейшего обследования, по ним наблюдают за эффективностью выбранного лечения. Даже после полного излечения больного для контроля ему необходимо будет сдавать анализ на онкомаркеры 1-2 раза в год.

Прием лекарственных препаратов, регулирующих работу кровеносной, сердечной и мочеполовой системы может исказить результаты исследований. При необходимости врач настоит на отмене лекарств на время обследования.

Не рекомендуется сдавать подобные анализы самостоятельно, без направления врача, так как онкомаркеры — это не точные показатели наличия заболевания, для подтверждения подозрений потом потребуется проведение других обследований.

Моча на онкомаркеры собирается в банку сразу после пробуждения и должна исследоваться как можно быстрее.

Проведение процедуры

Венозная кровь сдается только по утрам, натощак. Сдача анализов на онкомаркеры проводится не так, как обычные исследования. Кровь из вены набирается в шприц, а не в пробирку.

Моча для анализа на рак сдается в специальном стерильном контейнере.

Результаты анализа обычно готовы на 2-3 день.

Если в анализах обнаружилось наличие маркеров онкологии, пациенту назначается дальнейшее проведение диагностики:

УЗИ;
МРТ с контрастом;
МСКТ.

Взятие ткани из почки или мочевого пузыря на исследование проводится только в случае обнаружения опухоли.

Результаты и их расшифровка

В зависимости от метода проведения анализа, референсные значения онкомаркеров могут меняться. Обычно диапазон нормального содержания веществ в крови указывается рядом, на одной строке с результатом.

Полная расшифровка анализов для постановки точного диагноза должна проводиться на основании комплексных исследований.

Значения онкомаркеров рака почек:

Нормальные значения ХГЧ для взрослых:

Небеременные женщины репродуктивного возраста – от 0 до 1 МЕ/мл;
Небеременные женщины в менопаузе – от 0 до 7 МЕ/мл;
Мужчины – от 0 до 2 МЕ/мл.

Нормальные значения для онкомаркера NSE в крови – от 0 до 16.3 нг/мл;
Нормальные значения TU-M2 (пируваткиназа): от 0 до 15 ЕД/мл. Очень большое количество этого онкомаркера указывает на высокую степень агрессивности атипичных клеток опухоли.

Превышение нормальных значений (для каждой лаборатории они выражаются в своих единицах измерения) может указывать на наличие злокачественной опухоли в почках или других органах. Специальных маркеров, целенаправленно выявляющих рак в почках, не существует.

Онкомаркеры при раке мочевого пузыря:

Нормальные значения UBC в моче – от 0 до 15 нг/мл.
Норма содержания NMP22 в моче – от 0 до 10 ЕД/мл.
Для онкомаркера TPS в крови референсными считаются значения от 0 до 85 ЕД/л.

При обнаружении опухоли в мочевом пузыре или почках пациенту назначается биопсия пораженных участков тканей для установления характера новообразования.

Важно не забывать о том, что даже при наличии онкологического заболевания показатели анализов на маркеры могут быть в норме.

В заключение

В случае обнаружения в крови онкомаркеров рака почек пациенту необходима дополнительная диагностика, так как такие результаты не всегда указывают на наличие злокачественной опухоли.

Уровень данных белков в крови может повышаться не только под влиянием атипичных клеток.

Данная методика исследования позволяет врачу предположить наличие опухоли у пациента, что значительно ускоряет процесс постановки диагноза и увеличивает шансы на выздоровление в случае наличия рака.

Источник

Метод определения
UBC II ELISA (твердофазный иммуноферментный анализ реагентами фирмы IDL Biotech, Швеция).

Исследуемый материал
Смотрите раздел подготовка

Рак мочевого пузыря обычно имеет эпителиальную природу (преимущественно переходно-клеточный тип эпителия). Тест UBC предназначен для количественного исследования растворимых фрагментов цитокератинов (кератинов) 8 и 18 в моче, которые представляют собой промежуточные микрофиламенты – структурные элементы эпителиальных клеток. Как и другие цитокератины, они являются маркерами эпителия. При злокачественном перерождении и пролиферативном росте эпителиальных клеток стенки мочевого пузыря выделение в мочу цитокератинов (в частности 8 и 18) усиливается. Исследование концентрации цитокератинов в моче, которая непосредственно контактирует с эпителиальной опухолью мочевого пузыря, позволяет использовать эти вещества в качестве маркера активности опухоли.

Исследование концентрации UBC в моче целесообразно использовать как вспомогательный неинвазивный тест в комплексе обследований в целях диагностики и мониторинга рака мочевого пузыря. В выявлении активной переходно-клеточной карциномы мочевого пузыря чувствительность теста составляет 87% при специфичности 86% (по данным фирмы-производителя реагентов). При обследовании практически здоровых людей референсной группы у 95% результат UBC не превышал 35 мкг/мл.

Среди тестов, основанных на анализе мочи, ее цитологическое исследование (см. тест

№ 507

) остается стандартным диагностическим методом обследования таких пациентов. Но дополнительное исследование концентрации UBC в моче также может быть полезно для раннего выявления опухоли мочевого пузыря. По данным сравнительных исследований, чувствительность теста UBC выше, чем чувствительность цитологического исследования мочи, но специфичность более низкая. Реальна вероятность ложноположительных результатов: повышение уровня UBC возможно также при цистите, бактериальной инфекции мочевых путей, воспалительных неурологических заболеваниях в острой фазе и пр.

Исследование UBC не заменяет проведение цистоскопии, положительный результат может служить лишь дополнительным указанием на необходимость проведения цистоскопии и других углубленных обследований. Контроль уровня UBC помогает индивидуализировать интервал проведения цистоскопий, необходимых при мониторинге пациентов с раком мочевого пузыря. При этом следует учитывать ограничения применения теста (см. подготовку к исследованию) и использовать его под контролем общего анализа мочи (№116), чтобы избежать ложноположительных результатов. Данное исследование не рекомендуют использовать в качестве скринингового в связи с недостаточной специфичностью.

Пределы определения: 1 мкг/л – 200 мкг/л

Литература

Клинические рекомендации Европейской ассоциации урологов (EAU), 2010. Рак мочевого пузыря ТаТ 1 www.roou.ru/expert/eau/
Онкология. Клинические рекомендации (Ред. Чиссов В.И., Дарьялова С.Л.). – М., ГЭОТАР-Медиа, 2008 г., 702 с.
Giannopoulos A. et al. – Comparative evaluation of the diagnostic performance of the BTA stat test, NMP22 and urinary bladder cancer antigen for primary and recurrent bladder tumors. J.Urol. 2001 166(2): p. 470-475.
Sanchez-Carbato M. et al. Comparative predictive values of urinary cytology, urinary bladder cancer antigen, CYFRA 21-1 and MNP22 for evaluating symptomatic patients at risk for bladder cancer. – J.Urol. 2001, Vol. 165 (5), p.1462-1468.
Материалы фирмы-производителя реагентов https://www.idl.se/

Источник

Введение. Рак мочевого пузыря является самым частым новообразованием мочевыводящих путей. Ежегодно в мире раком мочевого пузыря заболевают 335,8 тыс. человек и 132,4 тыс. человек, то есть каждый третий умирает от этого заболевания. В 2011 году в Российской Федерации диагностировано 13784 случая РМП, при этом прирост этого заболевания за последние 10 лет составил 15,26%. Летальность от РМП на первом году с момента установления диагноза составляет 19,5% [1].

Сегодня в России под динамическим наблюдением находятся около 60 тысяч больных раком мочевого пузыря и только у 33,6% болезнь диагностируется на Т1 стадии заболевания [2]. Известно, что именно стадия рака мочевого пузыря определяет вид, характер лечения и прогноз заболевания для пациента. Вместе с тем частота ошибок, при определении стадии рака мочевого пузыря достигает 73% [3].

В настоящее время определение общепринятых критериев стадии рака мочевого пузыря: глубина инвазии опухоли, степень дифференцировки клеток, поражение регионарных лимфатических узлов и т.д., не всегда приводят к положительному результату лечения. Это подтверждают и данные анализа отдаленных результатов лечения больных с одной и той же диагностированной стадией раком мочевого пузыря. У одних пациентов после органосохраняющей операции наблюдается благоприятный исход, у других – быстро развивается рецидив и прогрессия опухоли. Это можно объяснить не изученным биологическим потенциалом рака мочевого пузыря [4]

Хорошо известно, что по клиническому течению выделяют поверхностный (Tis, Ta, T1), инвазивный (T2 -T4) и метастатический рак мочевого пузыря.

В Российской Федерации выявление больных с поверхностной формой рака (I стадия) составляет лишь 33,6%, в противоположность зарубежным данным, в соответствии с которыми I стадия рака мочевого пузыря диагностируется в 80% наблюдений. В нашей стране в 11,6-15,6% наблюдений выявляется IV стадия рака мочевого пузыря [5]

Эти цифры не внушают оптимизма и отражают неудовлетворительную диагностику поверхностного рака мочевого пузыря, позднюю обращаемость пациентов и неточное определение стадии заболевания и как следствие – неадекватность проводимого лечения – органоуносящие операции со снижением качества жизни больных и более высокая смертность.

Анализ результатов лечения больных раком мочевого пузыря показал, что назрела необходимость поиска новых дополнительных маркеров ранней диагностики, установления стадии и определении прогноза заболевания.

В клинических рекомендациях, выпущенных по инициативе Российского общества онкоурологов с разрешения Европейской ассоциации по урологии, в 2011 году сведения по применению конкретных молекулярных маркеров для диагностики рака мочевого пузыря отсутствуют. Нет их и в стандартах диагностики и лечения рака мочевого пузыря как в России, так и в Европе. Все вышесказанное позволило нам сформулировать цель нашего исследования.

Цель исследования: разработать панели молекулярно-биологических и иммуногистохимических маркеров для ранней диагностики, стадирования и прогрессирования рака мочевого пузыря.

Материал и методы. Исследование проводилось в несколько этапов. На первом этапе делали акцент на поиск маркеров для ранней диагностики РМП и в рамках федеральной целевой программы по борьбе с социально-значимыми исследованиями в 2008 году было начато исследование.

Проведено обследование 488 больного, находившихся на лечении в НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии Саратовского государственного медицинского университета им. В.И.Разумовского с диагнозом рак мочевого пузыря: 443 человека – основная группа, группа контроля – 25 практически здоровых лиц, группа сравнения – 20 пациентов с циститом и мочекаменной болезнью.

Возраст пациентов с раком мочевого пузыря колебался от 44 до 79 лет (средний возраст – 63 года). В числе обследованных пациентов – 60 женщин и 383 мужчин. Из 443 пациентов с раком мочевого пузыря в группу с поверхностным раком (Та-1N0M0) – включены 217(48,9%) человек, мышечноинвазивным раком без метастазов(T2-4N0M0) – 188(42,4%) человек и с метастатическим раком было- 38(8,6%) больных.

При гистологическом исследовании у всех 443 больных диагностирован переходноклеточный рак. По степени дифференцировки опухоли больные были распределены следующим образом: 223(50%) больных с высокодифференцированной опухолью (G1), 174(39%) больных с умереннодифференцированной опухолью (G2), 60(11%) больных с низкодифференцированной опухолью (G3).

Исследование содержания онкомаркеров, цитокинов, факторов ангиогенеза проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа. Определение онкомаркеров-фрагментов цитокератинов проводили в сыворотке крови и моче.

Содержание факторов роста эндотелия сосудов, трансформирующего фактора роста, фактора роста фибробластов определяли в сыворотке крови, маркеры апоптоза, интерлейкина-12, фактора некроза опухоли исследовали во взвеси мононуклеаров в плазме.

Иммуногистохимические реакции проводили на серийных парафиновых срезах, используя стрептавидин-биотиновый метод. Для иммуногистохимического исследования были использованы 13 коммерческих моноклональных антител, разделенные на группы по функциональной значимости: маркеры пролиферативной активности; супрессор опухолевого роста; маркеры апоптоза; рецептор эпидермального фактора роста; цитокератиновый профиль.

Интенсивность реакций, локализованных в цитоплазме, оценивали полуколичественным способом по 3-х балльной шкале.

Результаты реакций с антигенами, имеющими ядерную локализацию, оценивали в процентах, подсчитывая количество окрашенных ядер на 100 ядер в 3 полях зрения.

Статистический анализ проводили с использованием стандартного пакета программ статистической обработки результатов. Общая диагностическая эффективность количественных тестов определена с помощью ROC-анализа.

Результаты. Проведенные исследования на 13 иммуногистохимических и 11 молекулярно-генетических маркерах позволили выбрать наиболее информативные маркеры ранней диагностики рака мочевого: определение онкомаркера рака мочевого пузыря (UBC) в моче; фрагмента цитокератина ТРS в сыворотке крови и маркеров пролиферативной активности Кi67, Р63 и антигена пролиферирующего клеточного ядра в тканях опухоли методом иммуногистохимии.

Были установлены значения в разных группах: у практически здоровых лиц, с заболеваниями мочевого пузыря неопухолевой природы и РМП (табл. 1).

По нашим данным повышение маркера UBC в моче больше чем 50,1 мкг/л – это повод для детального обследования пациента. Резкое увеличение данного маркера в крови определяется при начале инвазии опухоли в мышечный слой.

При прорастании опухоли в сосуды, фрагменты этих же цитокератинов (ТРА и ТРS) появляются в кровотоке. Нарастание содержания этих маркеров в сыворотке крови коррелирует со степенью инвазии опухоли.

Из всех изучаемых маркеров роста наиболее значимым в диагностике рака мочевого пузыря оказался фактор роста эндотелия сосудов. Его резкое увеличение является неблагоприятным фактором прогноза рака. Изменение уровня факторов апоптоза (Fas и Fas-лиганда) можно использовать только в качестве прогностического фактора, так как их увеличение обусловлено процессом активного распада лимфоцитов, что неизбежно приведет к иммуносупресии и прогрессу опухолевого роста.

При анализе показателей экспрессии иммуногистохимических маркеров, имеющих ядерную локализацию, в различных группах больных с раком мочевого пузыря были получены следующие результаты:

Наиболее информативными были маркеры пролиферации (Ki67) и белки – регуляторы клеточного цикла (Р53 и Р63) , которые не дают экспрессии в группе сравнения. Кроме того, при применении маркеров Ki67и Р53 отмечена высокая степень корреляционной зависимости между стадией рака мочевого пузыря, процентом экспрессирующих клеток и интенсивностью иммуногистохимической реакции.

При иммуногистохимическом исследовании на антигены, локализованные в цитоплазме, было установлено, что их экспрессия во всех исследованных группах больных является положительной. Достоверно значимых различий между группами больных по показателям иммуногистохимических реакций с цитокератинами не выявлено.

И только цитокератин 18 продемонстрировал трехкратное увеличение количества экспрессирующих клеток уротелия между группой сравнения и группой больных с неинвазивным раком.

Таким образом, первый этап проведенных исследований на 13 иммуногистохимических и 11 молекулярно-биологических маркерах позволил установить следующие маркеры ранней диагностики: (UBC) в моче; фрагмента цитокератинов ТРS и TPA в сыворотке крови и маркеров пролиферативной активности Кi67, Р63 и антигена пролиферирующего клеточного ядра в тканях опухоли методом иммуногистохимии.

На втором этапе проведенных исследований была установлена связь изменений уровней цитокератинов TPA, TPS и UBC с признаками инвазии и стадией заболевания у больных РМП с различным уровнем инвазии опухоли (табл. 2).

Как видно из представленной таблица у больных с мышечно-инвазивным раком мочевого пузыря (Т2-Т4) характерны значения онкомаркера UBС выше чем 64,1 мкг/мл, ТРS >106,93 Ед/л и TPA> 1,89нг/мл. У больных с раком мочевого пузыря без мышечной инвазии показатели этих онкомаркеров – нижеуказанных величин.

При определении чувствительности и специфичности каждого маркера мы получили достаточно высокие показатели между этими показателями (табл.3).

Проведенный РОС – анализ показал статистически значимые различия между стадиями РМП по всем трем маркерам (табл. 4, рис. 1).

Далее нами был проведен сравнительный анализ ошибок в маркерной диагностике глубины инвазии опухоли на дооперационном этапе и в послеоперационном периоде с морфологическим исследованием (табл.5).

Было установлено, что при раке мочевого пузыря без мышечной инвазии наиболее целесообразно использовать уринальный онкомаркер UBC, так как у него высокая чувствительность (88%) в верификации и стадировании (82%) переходноклеточной карциномы и самая маленькая ошибка (16%). Не высокая чувствительность и точность в установлении стадии Та-Т1 с помощью TPA и TPS вполне объяснима, так как появление их в сыворотке крови происходит при прорастании опухоли в стенку сосуда, что происходит при инвазивном росте.

При мышечно-инвазивном РМП сохраняется высокая чувствительность UBC, а точность в определении стадии снижается, что может объясняться большим размерами опухоли и ее экзофитным ростом. В тоже время исследование сыворотки крови на TPA и TPS показывает значительное увеличение в точности стадирования и снижении величины ошибки.

Следует отметить, что для уточнения стадии РМП наиболее целесообразно применение одновременно всех трех онкомаркеров, так как это увеличивает чувствительность и специфичность применяемого метода, что подтверждается данными проведенного RОC-анализа.

Применение всех трех маркеров позволяет провести дифференциальную диагностику доброкачественного и злокачественного процессов, поверхностного и мышечно-инвазивного РМП, а также уменьшить количество диагностических ошибок в определении стадии, которая по данным некоторых авторов составляет 68-72% [6]. В клинике урологии и НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии СГМУ до применения маркерной диагностики общая ошибка в определении стадии заболевания составляла 44, 25%, к 2012году она уменьшилась до 15,2%. В 2012 году на «Способ диагностики стадии инвазии рака мочевого пузыря» с применением данных маркеров был получен патент на изобретение.(№2454181 от 27.06.2012)

При иммуногистохимическом исследовании 12 онкомаркеров было установлено, что для диагностики стадии рака мочевого пузыря и прогноза заболевания рационально использовать только 4 маркера: Ki-67, p63, р53 и EGFR (табл.6).

Как видно из представленной таблицы, данные маркеры не дают положительной экспрессии в группе сравнения, что может использоваться при дифференциальной диагностике РМП и других неоплазий. Кроме этого процент экспрессирующих клеток указанных маркеров позволяет судить о степени инвазии РМП, что является важным моментом для определения стадии заболевания, а, следовательно, и прогноза.

При анализе показателей экспрессии маркеров в каждую из стадий РМП, представленной было установлено, что маркер Ki-67 показал 100% экспрессию у пациентов со стадией РМП Т3 и Т4, в то время как в стадию Т2 его экспрессия составила только 56,5%, что является достоверным различием (табл. 7).

Исследования показали: Ki-67 можно весьма перспективно использовать для дифференциальной диагностики между Т2 и Т3-Т4, что является очень важным, так как выход опухоли за пределы органа свидетельствует о неблагоприятном прогнозе и именно поэтому этот маркер может быть использован как прогностический, способный повлиять на выбор тактики лечения у больных МИРМП.

С целью определения прогностической значимости были изучены отдаленные результаты лечения 27 больных РМП, чью судьбу удалось проследить на протяжении 5 лет. У всех пациентов при иммуногистохимическом исследовании ткани опухоли Ki-67 дал положительную экспрессию.

Из 27 больных РМП 11 пациентам было выполнено органосохраняющее комплексное лечение, включающее в себя трансуретральную электрорезекцию стенки мочевого пузыря вместе с опухолью и системную полихимиотерапию по схеме M-VAC (метотрексат, винбластин, доксорубицин, цисплатин). У 13 больных произведена цистэктомия, а шесть пациентов признаны иноперабельными, им осуществлялась только симптоматическая терапия (табл.8).

Из представленной таблицы видно, что из 27 больных РМП – 16 (59,2%) умерло. Из них 10 (62,5%) – в первый год. Из 10 умерших в первый год 9 (90%) пациентов имели экспрессию Ki-67 ≥ 30%. У всех 9 больных стадия заболевания была Тзb-T4N0-1M0-1.

В то же время из 11 больных РМП, которые прожили более 5 лет, в 73% случаев экспрессия Ki-67 составила < 30%. Стадия заболевания у выживших больных была: Т1N0M0 – 4; Т2N0M0 – 6; Т3N0M0 – 1.

При мышечно-инвазивном РМП Т2N0M0-Т3-4N0-1M0-1 (22 больных) в первые 24 месяца умерли 14 (62%). Экспрессия Ki-67 у этих больных колебалась от 30 до 80%.

При органосохраняющем лечении больных в стадии Т1-Т2 (11 пациентов) в первые два года умерло 5 (45,4%) больных, у которых экспрессия Ki-67 составляла ≥ 30%. После цистэктомии (n=13) умерло 8 (61,5%), у 7 (87,5%) из них Ki-67 был > 30%. Из 11 пациентов, проживших 5 лет и более, только в двух случаях Ki-67 было > 30% (34% и 44%), у остальных 9 (82%) – Ki-67 был менее 30%.

Проведенная сравнительная оценка эффективности различных иммуногистохимических маркеров в определении стадии и прогнозе мышечно-инвазивного РМП показала, что наиболее эффективным маркером является маркер пролиферативной активности – Ki-67. Установлено, что при экспрессии Ki-67 > 30%, независимо от способа лечения, в 81,2% возможен рецидив заболевания и летальный исход в течение 24 месяцев. В то же время при значениях Ki-67 < 30% пятилетняя выживаемость составляет 70%.

Таким образом, научно-исследовательская работа, проводимая и НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии более 6 лет, и являющаяся отражением интеграции клинической урологии, лабораторной диагностики и морфологии позволила вывить наиболее значимые маркеры в ранней диагностике, определении стадии и прогноза рака мочевого пузыря.

Выводы

Для раннего выявления рака мочевого пузыря, а также проведения дифференциальной диагностики между доброкачественным и злокачественным процессом, целесообразно определение онкомаркера рака мочевого пузыря (UBC) в моче; фрагментов цитокератинов ТРS,ТРА в сыворотке крови и маркеров пролиферативной активности Кi67, Р63 и антигена пролиферирующего клеточного ядра в тканях опухоли методом иммуногистохимии. Применение данных маркеров в НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии СГМУ позволило повысить выявление рака мочевого пузыря на 1стадии с 18,1% в 2006 г. до 48,9% в 2011 г. и увеличить число органосохраняющих операций за этот же период времени с 57% до 82%
Включение онкомаркеров UBC, TPA и TPS в комплексную диагностику и стадирование рака мочевого пузыря позволяет провести дифференциальную диагностику доброкачественного и злокачественного процессов, поверхностного и мышечно-инвазивного РМП и снизить частоту диагностических ошибок с 44,2% до 15,2%.
Маркер пролиферативной активности Ki-67 может быть использован в качестве вспомогательного маркера при выборе объема оперативного лечения (органосохраняющая операция или цистэктомия). Кроме того независимо от способа лечения в 81,2% случаев Ki-67 может предсказать неблагоприятный исход заболевания в течение 24 месяцев.
Применение молекулярно-биологических и иммуногисто-химических маркеров в диагностике рака мочевого пузыря позволило за последние пять лет увеличить объем радикальных операций с 78% до 92,1% и уменьшить летальность у данной категории больных в первые 2 года после проведенного лечения с 32% до 15,9%

Источник